特点:
(1)采用Promega公司特有psiCHECK质粒;
(2)所采用的Luciferase双萤光报告系统,可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度;
(3)采用瞬时转染技术,操作简便、快速,周期短,适用于绝大多数细胞类型。
3、miRNA反义锁核酸的瞬时转染:
锁核酸(locked nucleic acid,LNA)是一种新型的寡核酸衍生物,结构中β-D-呋喃核糖的2’-O,4’-C位通过缩水作用形成环形的氧亚甲基桥、硫亚甲基桥或胺亚甲基桥,呋喃糖的结构锁定在C3’内型的N构型,形成了刚性的缩合结构。LNA作为一种新的反义核酸,具有与DNA/RNA强大的杂交亲和力、反义活性、抗核酸酶能力、水溶性好及体内无毒性等优点。LNA可用于miRNAs原位杂交以及的内源分子的反义封闭,是研究miRNA功能的常规手段。